離心分離樣品梯度回收方法之一---傾倒法

    用凱達離心機分離樣品結(jié)束后，必須收集梯度中的樣品以便進一步分析，因此需要對梯度進行分級取樣，在分級過程中要保護離心時得到的分離度。一般有直接收集和連續(xù)收集。
下面介紹直接回收區(qū)帶之傾倒法
該方法適用于差速離心。普通的醫(yī)用離心機離心沉淀或差速離心后，懸浮液就簡單地分為上清液與沉淀兩個部分。所謂傾倒法就是將上清液傾倒出來，使上清液與沉淀分開，從上清液或沉淀中取得所要求收取的樣品部分。該法的特點是簡單、快捷、方便。

在這種直接取沉淀或上清液的離心分離中，如果形成的沉淀不“密實”，傾出上清液時，沉淀有時也會被倒出，有時沉淀與上清液發(fā)生重新混合。為了使上清液與沉淀分得清楚，可用提高轉(zhuǎn)速、增加離心力的方法使沉淀聚結(jié)得密實。這種做法有時往往并不可行，如果離心力過高，樣品在上清液中會造成失去；如果樣品存在于沉淀中，過分結(jié)實的沉淀可能會造成部分樣品的不可逆聚集、黏結(jié)，不能重新分散懸浮；當(dāng)轉(zhuǎn)速高、離心力很大時，大分子間的內(nèi)力受到影響如氫鍵作用等，樣品在離心管底部形成堅硬的餅塊。這種情況下要根據(jù)樣品中雜質(zhì)存在的形式、結(jié)構(gòu)組成、s值大小來設(shè)置選擇轉(zhuǎn)速。傾倒上清液時應(yīng)該順沉淀形成的位置，傾倒時動作應(yīng)該盡量地穩(wěn)、盡量避免搖晃。如下圖（如果沉降不夠密實，盡可能用吸管吸出上清液）。